Tha àite cudromach aige ann am pròiseasan beatha, fosphorylating Tyrr, Ser, Thr, suidhichte air peptides.Tha an aminoideach fosphorylated air a chleachdadh gu cumanta ann a bhith a’ dèanamh peptide searbhag fosphoric, air a chleachdadh an-dràsta ann an aon amino-aigéid phenyl phosphorylated.Bithear a’ cleachdadh amino-aigéid HBTU/phosphorylated gu cumanta gus an dòigh HOBt/DIEA amino-aigéid phosphorylated a cheangal, ach tha am peptide searbhag fosphoric a’ taghadh easbhaidhean an dòigh-obrach seo, gu h-àraidh anns na peptides peptide fada nas fhaide no aminoid phosphate, a’ ceangal an èifeachdais ìosal, ìosal. purrachd an toraidh mu dheireadh.Airson a’ phosphopeptide seo, bheachdaich sinn air dòigh-obrach iar-phosphorylation roghnach.Is e am pròiseas ginealachd toirt air falbh buidhnean dìon taobh-slabhraidh aminoideach a dh’ fheumas a bhith air an ainmeachadh às deidh synthesis peptide.Airson Tyr, faodaidh Thr freagairt gu dìreach le bhith a’ cleachdadh amino-aigéid le slabhraidhean taobh gun dìon.-Ser (trt), air a thoirt air falbh gu cainneachdail aig àrainneachd 1% TFA / DCM.
Phosphorylation, le dà benzene phosphite phosphoramide agus ceithir naitridean air an gineadh agus phosphoramide tetrazolium gnìomhach eadar-mheadhanach, ceangailte ris an hydroxy, an uair sin fo an acid peroxide oxidation phosphoryl cruthachadh, coileanta reaction.
Aig an àm seo, an peptide phosphorylated modh atharrachaidh tha dà phrìomh sheòrsa:
(1) toirt a-steach dìreach de amino-aigéid fosphorylated meadhanach cinnteach a-steach don t-sreath polypeptide;
(2) às deidh an roisinn a chaidh a chruthachadh air an t-sreath peptide, gu Ser, Tyr, no Thr phosphorylation de hydroxyl slabhraidh taobh.
1) bheir gealltanas meadhanach amino-aigéid fosphorylated a-steach gu dìreach sreath peptide:
Is e sin, bidh amino-aigéid a dh’ fheumar a bhith fosphorylated air an fosphorylated agus air an dìon gu h-iomchaidh ro-làimh a ’cleachdadh (Thr, Ser no Tyr), agus an uairsin thèid am fosphorylation a chaolachadh sìos gu puing taghaidh clàr-amais polypeptide stèidhichte air pròiseas ginealach àbhaisteach SPPS .Tha an dòigh seo furasta obrachadh, air a thighinn gu bhith na phrìomh dhòigh air iomairtean peptide atharrachadh phosphorylated.
2) às deidh an roisinn a chaidh a chruthachadh air an t-sreath peptide, gu slabhraidhean taobh Ser hydroxy phosphorylation, Tyr, no Thr:
Sgeadachadh fosphorylation a 'cleachdadh fosphorylation de aon ghiorrachadh a-steach don dòigh polypeptide, mar thoradh air a' bhacadh cruaidh a chruthaich buidhnean mòra ann an sgeadachadh slabhraidh taobh, tha e doirbh do phosphorylation de amino-aigéid a bhith a 'crìonadh leis an t-sèine peptide.Anns an àm ri teachd, bidh e nas duilghe a bhith a 'toirt a-steach amino-aigéid, gu h-àraid anns an sgeadachadh anns a bheil iomadh làrach fosphorylation, bidh an ginealach gu math duilich, tha an toradh deireannach iom-fhillte, duilich a sgaradh, agus tha an toradh gu math ìosal.
Mar sin, nuair a tha grunn làraich anns an t-sreath peptide air an fosphorylated, faodaidh aon roghnachadh an t-sreath peptide a ghineadh air an roisinn agus an uairsin a phosphorylate leis a ’bhuidheann taobh-slabhraidh hydroxyl de Ser, Tyr, no Thr: tha a ghinealach gu ìre mhòr a’ toirt a-steach toirt air falbh an roghnach. buidheann dìon slabhraidh taobh a dh’ fheumas aithneachadh amino-aigéid às deidh synthesis peptide.Airson Tyr, faodaidh Thr cleachdadh gu dìreach na slabhraidhean taobh aminoideach air an dìon mar fhreagairt.
Faodar bunait dìon slabhraidh taobh 1% àrainneachd TFA / DCM a thoirt air falbh gu cainneachdail.Nuair a thèid an dòigh seo a thaghadh, faodar eadar-mheadhan gnìomhach phosphoramidite tetrazolium a chruthachadh le bhith a 'cleachdadh dibenzyl phosphoramidite agus tetrazolium, ceangailte ri buidheann hydroxyl, agus an uairsin air a oxidachadh gus buidheann phosphoryl a chruthachadh anns an àrainneachd peroxyacid gus an ath-fhreagairt a choileanadh.
Ùine puist: Sultain-08-2023