Ann an rannsachadh bith-eòlasach, mar as trice bidh polypeptides le sreath fhada air an cleachdadh.Airson peptides le barrachd air 60 amino-aigéid san t-sreath, bidh abairt gine agus SDS-PAGE mar as trice air an cleachdadh airson an faighinn.Ach, bheir an dòigh seo ùine mhòr agus chan eil buaidh sgaradh toraidh deireannach math.
Dùbhlain agus fuasglaidhean airson synthesis peptide fada
Ann an synthesis peptides fada, tha duilgheadas againn an-còmhnaidh, is e sin, tha bacadh làidir an ath-bhualadh dùmhlachd ag àrdachadh le àrdachadh an t-sreath anns an t-synthesis, agus feumar an ùine ath-bhualadh atharrachadh gus am bi am freagairt coileanta.Ach, mar as fhaide an ùine ath-bhualadh, is ann as motha de bhuaidhean a thèid a thoirt a-mach, agus thèid cuibhreann den peptide targaid a chruthachadh.Tha fuigheall mar sin - slabhraidhean peptide easbhaidheach nam prìomh neo-chunbhalachd air an toirt a-mach ann an synthesis peptide fada.Mar sin, ann an synthesis peptide fada, is e am prìomh dhuilgheadas a dh’ fheumas sinn faighinn seachad air sgrùdadh a dhèanamh air na suidheachaidhean freagairt àrd-inbhe agus modhan freagairt, gus am bi an ath-bhualadh dùmhlachd amino-aigéid nas coileanta agus nas coileanta.A bharrachd air an sin, lughdaich an ùine ath-bhualadh, oir mar as fhaide an ùine ath-bhualadh, is ann as neo-riaghlaidh a bhios ath-bheachdan taobh, is ann as iom-fhillte a bhios na fo-thoraidhean.Mar sin, tha geàrr-chunntas air na trì puingean a leanas:
Faodar synthesis microwave a chleachdadh: Airson cuid de na h-amino-aigéid a choinnicheas sa phròiseas synthesis nach eil furasta an amalachadh, faodar synthesis microwave a chleachdadh.Tha toraidhean iongantach aig an dòigh seo, agus bidh e gu mòr a’ lughdachadh na h-ùine freagairt, agus a’ lughdachadh cruthachadh dà phrìomh fo-thoradh.
Faodar dòigh synthesis bloigh a chleachdadh: Nuair a tha e doirbh cuid de pheptides a bhith air an co-chur tro dhòighean synthesis cumanta agus nach eil iad furasta an glanadh, is urrainn dhuinn gabhail ri co-chòrdadh iomlan grunn amino-aigéid ann an earrann sònraichte den peptide chun t-sèine peptide gu h-iomlan.Faodaidh an dòigh seo cuideachd mòran dhuilgheadasan fhuasgladh ann an synthesis.
Faodar synthesis Acylhydrazide a chleachdadh: Tha acylhydrazide synthesis de peptides na dhòigh air synthesis ìre cruaidh de N-terminal Cys peptide agus ath-bhualadh roghnach ceimigeach polypeptide hydrazide C-terminal eadar cruthachadh bannan amide gus modh ceangail peptide a choileanadh.Stèidhichte air suidheachadh Cys anns an t-sreath peptide, bidh an dòigh seo a ’roinn an t-sreath peptide gu lèir ann an grunn shreathan agus gan co-chur gu chèile.Mu dheireadh, gheibhear am peptide targaid tro ath-bhualadh dùmhlachd ìre leaghaidh.Tha an dòigh seo chan ann a-mhàin a ’lughdachadh gu mòr an ùine synthesis de peptide fada, ach cuideachd a’ meudachadh gu mòr purrachd an toraidh mu dheireadh.
Glanadh peptide fada
Tha cho sònraichte ‘s a tha peptides fada gu do-sheachanta a’ leantainn gu co-phàirtean iom-fhillte de pheptides amh.Mar sin, tha e cuideachd na dhùbhlan peptides fada a ghlanadh le HPLC.sreath amyloid de phròiseas purchaidh polypeptide, a ’gabhail a-steach mòran eòlais agus air a chleachdadh gu soirbheachail ann a bhith a’ glanadh peptide fada.Le bhith a’ gabhail ri uidheamachd ùr, measgachadh de shiostaman glanaidh iomadach, dealachadh a-rithist agus dòighean eòlas eile, chaidh ìre soirbheachaidh glanadh peptide fada a leasachadh gu mòr.
Ùine puist: Giblean-18-2023